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細(xì)菌培養(yǎng)的基礎(chǔ)是配制培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方然后再加熱溶解，補(bǔ)足水分，其制作過程包括以下4個(gè)環(huán)節(jié)：①清潔玻璃器皿 一般用肥皂液煮沸30 min,或用重鉻酸鉀和濃硫酸配制的溶液浸泡數(shù)10 min，然后用清水沖洗，晾干后保存?zhèn)溆?。②配制液體培養(yǎng)基 a．根據(jù)需要配制培養(yǎng)基數(shù)量，先在燒杯中注入少量蒸餾水；b．按培養(yǎng)基配方稱量各種成分的原料，依次使之溶解；c．補(bǔ)足需水量；d．如用牛肉膏、蛋白胨配制時(shí)，需加熱熔化后溶解；e．加熱后，補(bǔ)足水分即可。③配制固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基里加入一定量的瓊脂，加熱熔化即可。④調(diào)pH 先用精密pH試紙測(cè)量培養(yǎng)基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基滴加1 mol/L 的NaOH溶液，邊加邊攪拌，并隨時(shí)用pH試紙測(cè)pH,直到7.4～7.6為止。反之則用1 mol/L的HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)。⑤過濾分裝 用紗布趁熱過濾，將濾液分裝于試管中，其量約為試管體積的1/5（不要玷污管壁）。⑥加棉塞 培養(yǎng)基分裝完畢以后，在管口上加一個(gè)棉塞。棉塞能防止雜菌污染；保證通氣良好，加棉塞時(shí)，應(yīng)使棉塞長(zhǎng)度的2/3在試管口內(nèi)。⑦包扎 每10支試管用線繩捆成一捆，并且在管口外面包上一層牛皮紙，然后用線繩扎好。在每捆試管外掛上標(biāo)簽，注明培養(yǎng)基名稱、配制日期和制作者姓名。
（2）滅菌 高壓蒸汽滅菌的效果是細(xì)菌培養(yǎng)的關(guān)鍵。具體操作如下：①打開高壓滅菌鍋，取出里面的滅菌桶，向鍋內(nèi)加水（最好用開水）水面與底架平齊為宜。②將扎好的試管管口向上，豎放在滅菌桶內(nèi)，再將滅菌桶放回滅菌鍋。
注意：滅菌桶內(nèi)的物品不能放得太擠，否則會(huì)影響滅菌效果。
?、奂由w，并將排氣軟管插入滅菌桶的排氣槽內(nèi)。以兩兩對(duì)稱的方式，同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)緊固螺栓，以防漏氣。④排出鍋內(nèi)的冷空氣。⑤當(dāng)鍋內(nèi)的壓力上升到規(guī)定壓力時(shí)，維持壓力20 min，切斷電源。⑥壓力降至0以后，打開排氣閥，排氣完畢打開滅菌鍋。
（3）擱置斜面 如果要制作斜面培養(yǎng)基，將滅菌后的培養(yǎng)基冷卻到50℃，每個(gè)試管帶棉塞的一端擱在一根木棒上，使培養(yǎng)基形成斜面，斜面的長(zhǎng)度不超過試管總長(zhǎng)度的一半。
(4) 檢驗(yàn)滅菌效果滅菌好的培養(yǎng)基在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，檢驗(yàn)滅菌效果。
帶圖文章來源于□ɑ。灆銫＋蒶葒銫的作品：
4.置于另一個(gè)小燒杯中.....
(所示為牛肉膏)
5. 用熱水溶解牛肉膏....
6.將溶解后的牛肉膏倒入大燒杯中.....
7.調(diào)節(jié)混合溶液的pH至7.4.....
8.稱取15-20克瓊脂..
9.把瓊脂加入到混合溶液中.....
10.加熱,直至瓊脂全部融化.....
11.分裝于試管,三角瓶中,加塞,包扎.冷卻后即為固體培養(yǎng)基...
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