色譜法(chromatography)又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”,是一種分離和分析方法,在分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。今天我們主要來了解一下色譜法的分類。
在色譜法中,靜止不動(dòng)的一相(固體或液體)稱為固定相(stationary phase) ;運(yùn)動(dòng)的一相(一般是氣體或液體)稱為流動(dòng)相(mobile phase)。
?、鄙V法按固定相分類主要有以下幾種方法:
?、僦V 為向玻璃管中填入固定相,以流動(dòng)相溶劑浸潤(rùn)后在上方倒入待分離的溶液,再滴加流動(dòng)相,因?yàn)榇蛛x物質(zhì)對(duì)固定相的吸附力不同,吸附力大的固著不動(dòng)或移動(dòng)緩慢,吸附力小的被流動(dòng)相溶劑洗下來隨流動(dòng)相向下流動(dòng),從而實(shí)現(xiàn)分離。
?、诒由V 是在玻璃板上涂以固定相涂層,然后點(diǎn)樣,下端浸入溶劑,同樣自下而上分離。常用于探索柱色譜實(shí)驗(yàn)條件,溶劑和固定相的選擇等。
③紙色譜 以濾紙條為固定相,在紙條上點(diǎn)上待分離的混合溶液的樣點(diǎn),將紙條下端浸入流動(dòng)相溶劑中懸掛,溶劑因?yàn)槊?xì)作用沿濾紙條上升,樣點(diǎn)中的溶質(zhì)從而被分離。
常用固定相有石膏、氧化鋁、蔗糖、淀粉等。
⒉色譜法按流動(dòng)相分類主要有以下幾種方法:
?、贇庀嗌V法 揮發(fā)性有機(jī)物
②超臨界流體色譜法 各種有機(jī)化合物
?、垭娚V法 離子和各種有機(jī)化合物
④液相色譜法 可以溶于水或有機(jī)溶劑的各種物質(zhì)
常用流動(dòng)相為水、苯等各種有機(jī)溶劑。
?、成V法的運(yùn)用可以根據(jù)目的分為兩大類。
?、僦苽湫陨V
制備性色譜的目的是分離混合物,獲得一定數(shù)量的純凈組分,這包括對(duì)有機(jī)合成產(chǎn)物的純化、天然產(chǎn)物的分離純化以及去離子水的制備等。相對(duì)于色譜法出現(xiàn)之前的純化分離技術(shù)如重結(jié)晶,色譜法能夠在一步操作之內(nèi)完成對(duì)混合物的分離,但是色譜法分離純化的產(chǎn)量有限,只適合于實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。
?、诜治鲂陨V
分析性色譜的目的是定量或者定性測(cè)定混合物中各組分的性質(zhì)和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等,定量的分析性色譜有氣相色譜、液相色譜等。色譜法應(yīng)用于分析領(lǐng)域使得分離和測(cè)定的過程合二為一,降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期,是比較主流的分析方法。在中華人民共和國(guó)藥典中,共有超過約600種化學(xué)合成藥和超過約400種中藥的質(zhì)量控制應(yīng)用了液相色譜的方法。