噻唑藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)原理究竟是怎樣的,一文讀懂
更新時(shí)間:2021-05-19 點(diǎn)擊次數(shù):522次
噻唑藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品是一種黃色粉末。有吸濕性。對(duì)光敏感。溶于水和乙醇,微溶于乙酸乙酯,不溶于氯仿。熔點(diǎn)171℃(分解)。較大吸收波長(zhǎng)378nm。
性狀:噻唑藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品微溶于甲醇中,但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其*溶解。195℃溶于水或DMSO。常配制成5mg/ml的儲(chǔ)備液。熔點(diǎn):195℃(分解)
用途:生化研究。常用于基于MTT檢測(cè)方法的細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性檢測(cè)。因?yàn)镸TT具有正電荷,它可以穿過細(xì)胞膜并被線粒體還原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有機(jī)溶劑。脫氫酶的檢測(cè),生化研究中酶活力的測(cè)定,測(cè)定NADH2、NADPH2和心肌黃酶(Diaphorase)。
噻唑藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測(cè)得的吸光度值(OD值),來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測(cè)藥物毒性,則表示藥物毒性越?。?。